东纳生物长期致力于生物医用微纳米材料的开发,具备从微纳米磁珠制备、表面修饰,到抗体偶联、下游应用验证的全链条技术平台。
为了方便您了解我们细胞分选的磁珠原料,现将MagBeads®系列微纳米磁珠产品信息进行汇总,并且附加了一些分选及激活效果的应用案例,您可根据实验需求自由选择。
东纳MagBeads®系列磁珠尺寸覆盖5纳米-30微米,可进行有柱式或无柱式细胞分选方案的开发。我们在磁珠表面构建了多种表面修饰如PEG、葡聚糖等,以提高其抗非特异性吸附的能力。
注:如果您需要的磁珠原料未在该列表中,或者您需要了解更多的信息,请您联系我们。
20 nm PEG化四氧化三铁磁性纳米颗粒(货号:Mag3200-01)用于人T细胞分选及激活
T细胞分选
20 nm PEG化四氧化三铁磁性纳米颗粒表面包被抗人特异性抗体CD4/CD8后,用少量磁珠标记细胞即可获得较高的分选纯度和分选效率,同时保持目的细胞高活性。
图1.Mag3200-01包被CD4/CD8抗体与竞品磁珠对3例人PBMC样本中的T细胞进行富集,通过流式检测分选得到的细胞组分中CD4+、CD8+T细胞的纯度(A,D),分选效率(B,E),及细胞活性(C,F)。
T细胞激活
20 nm PEG化四氧化三铁磁性纳米颗粒表面包被抗人CD3/CD28抗体,能够很好的模拟抗原提呈细胞介导的T细胞激活过程,使T细胞得到高效激活和扩增。
图2.Mag3200-01包被CD3/CD28抗体与竞品M分别对T细胞(细胞量:2 x105)进行激活,并于激活后24 h感染CD19-CAR病毒。NT组为竞品M激活,但未感染CD19-CAR病毒。(A)感染7、12和14天后,检测总细胞数。Mag3200-01组激活后,T细胞增殖能力更强。(B)感染7和14天后检测感染CD19-CAR病毒的细胞数,同时检测感染14天后中央记忆T细胞数。Mag3200-01组感染CD19-CAR病毒的细胞数多,激活的T细胞保留了更多T细胞记忆表型。(C)感染12天后,检测T细胞耗竭Marker PD-1的表达情况。Mag3200-01组T细胞耗竭更少。
20 nm葡聚糖修饰磁性纳米颗粒(货号:Mag3303)用于人T细胞分选
20 nm葡聚糖修饰磁性纳米颗粒表面包被抗人特异性抗体CD4/CD8后,用于人PBMC细胞中CD4+、CD8+T细胞分选,可获得高纯度、回收率及活性的T细胞。图3.使用Mag3303包被的CD4、CD8抗体磁珠与竞品M对人PBMC样本中的T细胞进行富集,通过流式检测分选得到的细胞组分中CD4+、CD8+T细胞的纯度(A,D),分选效率(B,E),及细胞活性(C,F)。
20 nm葡聚糖修饰四氧化三铁纳米颗粒(货号:CMD-Fe3O4)用于人T细胞激活
20 nm葡聚糖修饰四氧化三铁纳米颗粒表面包被CD3/CD28抗体,与T细胞共培养3天进行激活扩增,并与竞品对比了T细胞的扩增情况。CMD-Fe3O4包被CD3/CD28抗体后使T细胞在保持高活性的同时扩增了接近800倍。
图4.(A)对激活后的T细胞数目进行监测;(B)CMD-Fe3O4偶联CD3/CD28抗体后使T细胞在扩增了接近800倍;(C)对激活后的T细胞活性进行监测,T细胞保持高活性状态。
东纳生物3种不同表面修饰磁颗粒搭配不同厂家抗体诱导人T细胞激活
20 nm PEG化及葡聚糖修饰磁颗粒(Mag3200-01、Mag3303、CMD-Fe3O4)表面分别包被不同厂家CD3/CD28抗体,与T细胞共培养进行激活扩增,并对T细胞扩增情况进行监测。3种不同表面修饰磁颗粒搭配不同厂家抗体,均能使T细胞发生明显扩增,扩增倍数高达900多倍。客户可根据已有抗体筛选合适的磁颗粒。
图5.东纳3种磁颗粒表面修饰CD3/CD28后,T细胞激活倍数监测
100-300 nm磁珠无柱式阴选目的细胞
分别在100-300 nm葡聚糖磁珠表面包被SA,采用阴选的方式从HL-60及Raji细胞的混合细胞液中分选Raji细胞(占比15%),检测所获得目的细胞的分选纯度、分选效率及细胞活性。图6.100 nm和300 nm葡聚糖磁珠包被SA后分选细胞的效果
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